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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24
 
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產(chǎn)品名稱:
膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24
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膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24相關(guān)產(chǎn)品:
9二去甲基米諾環(huán)素說明書
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  膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號(hào)

膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24

貼壁生長

EY-X63442

細(xì)胞名稱  膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T24
形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞源自一位81歲白人女性患者的膀胱移行細(xì)胞癌組織;來源于移行細(xì)胞癌病人的白血病和血漿對T24和相關(guān)細(xì)胞株有細(xì)胞毒性;倍增時(shí)間為19小時(shí);含ras(H-ras)癌基因,表達(dá)腫瘤*抗原。

培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:8傳代,每周換液2~3次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rrTNF-a, CF (10 UG)細(xì)胞名稱: 人食管癌細(xì)胞;NEC RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrTNF-a (50 UG)細(xì)胞名稱: 人膀胱鱗癌細(xì)胞;SCaBER MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA,1mM丙鈉

rrTNF-a (10 UG)細(xì)胞名稱: 人肺鱗癌細(xì)胞;SK-MES-1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

rRTN1-A MAb (Cl 559706) (100 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrTIMP-1, CF (10 UG)細(xì)胞名稱: 人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞;CCC-HPE-2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS

rrTIM-1, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

rrTie-2/Fc, CF (100 UG)細(xì)胞名稱: 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;T47D[T-47D] RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;0.2Units/ml牛胰島素

rrROBO1/Fc, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671SublineNo.2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrRAGE/Fc, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 人甲狀腺鱗癌細(xì)胞;SW579[SW579;SW-579] L15:LeibovitzMedium10%FBS

rrPTX2/SAP, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞;TJ905 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrPTX2/SAP (50 UG)細(xì)胞名稱: 人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞;TT F12K10%FBS

rrProlactin R/Fc, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞;U2OS-LucteT-on DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%Tetsystem提供的胎牛血清;200μg/mlG418

rrPDGF-BB, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞;ACC-2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrPDGF-BB (50 UG)細(xì)胞名稱: 人原位胰腺腺癌細(xì)胞;BxPC-3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrPDGF-AB, CF (10 UG)細(xì)胞名稱: 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤;Y79 RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

rrPDGF-AA, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;CT26.WT[CT26WT] RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞;T241,3-二磷甘油(1,3-DPG)ELISA試劑盒iNOSELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酶(CAD)ELISA試劑盒iNOSELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒iNOSELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒INSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒INSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒INSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人對(CTX)ELISA試劑盒INSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA試劑盒INSELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24
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