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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm
 
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產(chǎn)品名稱(chēng):
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm相關(guān)產(chǎn)品:
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  小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63435

細(xì)胞名稱(chēng)  小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm
形態(tài)特性: 上皮樣,多邊形及圓形細(xì)胞

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 1980年建系,人肺小細(xì)胞肺癌,組織塊法培養(yǎng),10日細(xì)胞生長(zhǎng),*傳代112日;免疫缺陷小鼠皮下移植成功。STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞與另外兩株肺癌細(xì)胞LTEP-a2、LTEP-a3為同一遺傳背景,懷疑存在細(xì)胞間的交叉污染。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法:

傳代情況: P87

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-)
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
StemXVivo Osteogenic Sup (1 VL)細(xì)胞名稱(chēng): 表達(dá)SV40T和EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293ET IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

StemXVivo Osteo/Adipogenic Med (250 ML)細(xì)胞名稱(chēng): 表達(dá)小鼠MHCⅠ類(lèi)分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

StemXVivo MSC Media (250 ML)細(xì)胞名稱(chēng): 人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞;BeWo F12:Ham'sF12NutrientMixture10%FBS

StemXVivo Culture Matrix (1 ML)細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1 IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%小牛血清

StemXVivo Chondrogenic Sup (1 VL)細(xì)胞名稱(chēng): SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

StemXVivo Chondrogenic Media (50 ML)細(xì)胞名稱(chēng): SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

SSEA-4 PerCP MAb (MC-813-70) (100 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116[HCT116] IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

SSEA-4 NL637 MAb (MC-813-70) (0.5 ML)細(xì)胞名稱(chēng): 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS

SSEA-4 NL557 MAb (MC-813-70) (0.5 ML)細(xì)胞名稱(chēng): 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;IL-3

SSEA-4 Fluor MAb (MC-813-70) (100 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 人腎小管上皮細(xì)胞;HKC DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS

SOD Assay (100 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

shHRP-DAB CTS Kit (50 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo F12K10%FBS

shHRP-AEC CTS Kit (50 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

Ser/Thr Phosphatase Substr I (1 MG)細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

SB Transposase MAb (324622) (100 UG)細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480[SW480;SW-480] IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS

SB Transposase Aff Pur PAb (100 UG)細(xì)胞名稱(chēng): Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium10%FBS
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;LTEP-sm豬白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒IL-3ELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒IL-3ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒IL-3ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒IL-3ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人龍(Prednisolone)ELISA試劑盒IL-3ELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒IL-4ELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人金葡菌腸素(SE)ELISA試劑盒IL-4ELISAKIT產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人性休克綜合征素1(TSST-1)ELISA試劑盒IL-4ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 LTEP-sm
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