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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>乳腺癌細胞;BC-024
 
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產(chǎn)品名稱:
乳腺癌細胞;BC-024
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  乳腺癌細胞;BC-024的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

乳腺癌細胞;BC-024

貼壁生長

EY-X63674

細胞名稱  乳腺癌細胞;BC-024
形態(tài)特性: 上皮樣細胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: BC-024乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎研究和臨床研究的材料。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C21

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Crebanine

CAS No.:25127-29-1

中文名:克班寧

分子式:C20H21NO4

3O基沒食子 訂購|咨詢  神經(jīng)源素3(NEUROG3) 規(guī)格: 20mg

龍膽苦苷 訂購|咨詢  神經(jīng)源素3(NEUROG3) 規(guī)格: 20mg

劍皂苷元 訂購|咨詢  神經(jīng)顆粒素(NRGN) 規(guī)格: 20mg

絡塞琳 訂購|咨詢  神經(jīng)顆粒素(NRGN) 規(guī)格: 10mg

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茴香腦 訂購|咨詢  神經(jīng)激肽B(NKB) 規(guī)格: 20mg

莪術 訂購|咨詢  神經(jīng)激肽B(NKB) 規(guī)格: 20mg

對香豆 訂購|咨詢  神經(jīng)激肽B(NKB) 規(guī)格: 20mg

大黃素 訂購|咨詢  誘導型一氧合酶(NOS2) 規(guī)格: 20mg

柴胡皂苷A 訂購|咨詢  誘導型一氧合酶(NOS2) 規(guī)格: 20mg

扁桃 訂購|咨詢  誘導型一氧合酶(NOS2) 規(guī)格: 20mg

蝙蝠葛苷 訂購|咨詢  誘導型一氧合酶(NOS2) 規(guī)格: 10mg

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補骨脂素 訂購|咨詢  絨毛蛋白1(VIL1) 規(guī)格: 20mg

莽草 訂購|咨詢  絨毛膜(CG) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

三七皂甙 R1 訂購|咨詢  絨毛膜α肽(CGα) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial

大黃 訂購|咨詢  結合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

訂購|咨詢  結合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: UV≥98%,20mg/vial

WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Enoxacin

BLK/MODY11  B淋巴細胞酪激酶抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Ofloxacin

COG1  COG1蛋白抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Ofloxacin

BAP31  BAP31蛋白抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Abacavir

ADORA1/Adenosine A1 Receptor  腺苷A1受體抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Abacavir

SDHB  鉻細胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Nicotinamide

ApoER2  載脂蛋白E2受體抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Nicotinamide

CRMP1  二氫嘧啶酶相關蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Cyproterone acetate

葡萄糖脫氫酶  進口、國產(chǎn)  英文名稱:GlucoseDehydrogenase  含量:BR,98%

葡萄糖酶  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Glucoseoxidase  含量:BR,50u/mg

葡萄籽提取物  進口、國產(chǎn)  英文名稱:GrapeSeedExtract  含量:AR,99%

蒲桃  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Pimelicacid  含量:高純,99%

普鈣  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Calciumhypophosphitemonohydrate  含量:CP,99%

七水合二  進口、國產(chǎn)  英文名稱:SSodiumphosphatedibasicheptahydrate  含量:CP

七縮五硼銨  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Ammoniumpentaborate  含量:CP,98%

漆酶  進口、國產(chǎn)  英文名稱:LaccasefromRhusvernificera  含量:BR,5u/ul

汽巴藍F3GA  進口、國產(chǎn)  英文名稱:CibacronBlueF3GA  含量:高純

鉛白  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Lead(II)carbonate  含量:CP,95%
乳腺癌細胞;BC-024營養(yǎng)瓊脂斜面規(guī)格:250g用途:用于細菌的純化培養(yǎng)

改良Skirrow氏肉湯規(guī)格:FBP溶液用途:1ml每支含量

改良Skirrow瓊脂添加劑規(guī)格:1ml*5支用途:每支添加于100ml改良Skirrow氏肉湯中

改良BPLS瓊脂規(guī)格:250g用途:用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)

乳菌/雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于乳菌/雙歧桿菌的顯色培養(yǎng)

Bolton肉湯規(guī)格:250g用途:用于空腸彎曲菌的增菌(GB標準)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關關鍵字: 乳腺癌細胞 BC-024
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